O ozônio foi proposto como um agente anti-séptico alternativo em odontologia com base em relatos de seus efeitos antimicrobianos nas formas gasosa e aquosa. Este estudo investigou se o ozônio gasoso (4 x 10⁶ug/ml) e o ozônio aquoso (1,25-20 ug/ml(-1)) exercem quaisquer efeitos citotóxicos nas células epiteliais orais humanas (BHY) e fibroblastos gengivais (HGF-1) em comparação com anti-sépticos estabelecidos [digluconato de clorexidina (CHX) 2%, 0,2%; hipoclorito de sódio (NaOCl) 5,25%, 2,25%; peróxido de hidrogênio (H (2) O (2)) 3%], ao longo de um período de 1 min, e comparado com o antibiótico metronidazol, ao longo de 24 h. Foram avaliadas contagens de células, atividade metabólica, ligação de Sp-1, níveis de actina e apoptose. Descobriu-se que o gás ozônio tem efeitos tóxicos em ambos os tipos de células. Essencialmente, nenhum sinal citotóxico foi observado para o ozônio aquoso. CHX (2%, 0,2%) foi altamente tóxico para as células BHY e ligeiramente (2%) e não tóxico (0,2%) para as células HGF-1. NaOCl e H (2) O (2) resultaram em viabilidade celular marcadamente reduzida (BHY, HGF-1), enquanto o metronidazol apresentou toxicidade leve apenas para células BHY. Em conjunto, o ozônio aquoso revelou o nível mais alto de biocompatibilidade dos anti-sépticos testados.